在總氮和氨氮的檢測(cè)中，最常用的方法是《堿性過(guò)硫酸鉀消化紫外分光光度法》（HJ636-2012）和《納氏試劑分光光度法》（HJ535-2009）。總氮的定義是水中各種形式的無(wú)機(jī)和有機(jī)氮的總量，包括無(wú)機(jī)氮如NO3-、NO2-和NH4+，以及有機(jī)氮如蛋白質(zhì)、氨基酸和有機(jī)胺，以毫克計(jì)。每升水的氮。氨氮是指水中以游離氨（NH3）和銨離子（NH4+）形式存在的氮。兩者都經(jīng)常用來(lái)表示水體被營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)污染的程度。
理論上，總氮等于氨氮、有機(jī)氮和硝酸鹽氮之和。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中，往往達(dá)不到理論結(jié)果，部分樣品中可能存在氨氮≥總氮。為什么會(huì)發(fā)生這種反轉(zhuǎn)，問題出在哪一步？
影響兩種結(jié)果準(zhǔn)確性的因素
樣品保存的影響
由于樣品中的氮化合物是不斷變化的，因此水樣采集后應(yīng)立即檢測(cè)或存放在4℃以下的冰箱中，但不得超過(guò)24小時(shí)。如長(zhǎng)期存放，在1000ml水樣中加入0.5ml硫酸（1.84g/ml），酸化pH值小于2，盡快測(cè)定。在樣本采集過(guò)程中，應(yīng)考慮與外界空氣交叉污染的可能性，做到與外界空氣交叉污染的可能性，取樣后應(yīng)及時(shí)封存。避免光線引起的溫度變化和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部環(huán)境引起的誤差。
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的影響
總氮和氨氮的分析應(yīng)在無(wú)氨的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行。環(huán)境不應(yīng)含有石油和其他氮化合物。實(shí)驗(yàn)室分析氨氮等氮項(xiàng)目的總氮項(xiàng)目，所用試劑和玻璃器皿也應(yīng)分開存放，并保持干燥、清潔，避免交叉污染。
試劑和藥物的選擇和制備的影響
任何溶液的制備都離不開水這一介質(zhì)。首先是制備無(wú)氨水，因?yàn)樵谥苽錈o(wú)氨水的過(guò)程中在此過(guò)程中，空氣中的氨或銨鹽不可避免地會(huì)溶于水，從而污染試劑水。這種環(huán)境會(huì)給試劑空白帶來(lái)難以消除的錯(cuò)誤。特別是會(huì)增加總氮的試劑空白，使總氮的檢測(cè)值小于實(shí)際值。因此，配制無(wú)氨純水時(shí)，一定要妥善保存，要盡快配制。由于總氮的測(cè)定依據(jù)《堿性過(guò)硫酸鉀消解紫外分光光度法》（GB11894-89），該方法雖然步驟比較簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備要求不高，但對(duì)空白試驗(yàn)的吸光度有嚴(yán)格要求，影響空白的主要因素是過(guò)硫酸鉀的質(zhì)量。在制備堿性過(guò)硫酸鉀溶液的過(guò)程中，建議先制備氫氧化鈉溶液，再制備過(guò)硫酸鉀溶液。由于過(guò)硫酸鉀溶解很慢，可用水浴加熱，加熱溫度控制在55～60℃之間。當(dāng)過(guò)硫酸鉀溶液完全溶解并冷卻至室溫時(shí)，將其緩慢加入氫氧化鈉溶液中。同時(shí)攪拌，防止氫氧化鈉放熱導(dǎo)致溶液溫度過(guò)高導(dǎo)致過(guò)硫酸鉀局部失效。當(dāng)過(guò)硫酸鉀試劑質(zhì)量不合格時(shí)，會(huì)導(dǎo)致空白值偏高，甚至嚴(yán)重影響樣品結(jié)果。因此，配制堿性過(guò)硫酸鉀溶液時(shí)，水浴溫度應(yīng)盡量控制在50～60℃之間，否則過(guò)硫酸鉀會(huì)分解導(dǎo)致失效，影響結(jié)果。
消化和比色時(shí)間的影響
由于“奈斯勒試劑分光光度法”測(cè)定氨氮的過(guò)程中沒有復(fù)雜的步驟，只需要10min的顯色時(shí)間，檢測(cè)周期幾乎沒有氨氮的損失，而且在總的檢測(cè)過(guò)程中氮，分解后的原子氧在120℃～124℃下消化30分鐘，可將水樣中含氮化合物的氮元素轉(zhuǎn)化為硝酸鹽。根據(jù) 220nm 和 275nm 波長(zhǎng)處的吸光度推斷總氮含量。但由于壓力鍋內(nèi)溫度、試劑等問題，過(guò)硫酸鉀消解往往不完全，比色管的地塞未完全封閉，導(dǎo)致氨氣揮發(fā)，樣品在蒸煮過(guò)程中蒸發(fā)。消化過(guò)程，導(dǎo)致隨后將純水添加到標(biāo)記線。增加和總氮含量少，導(dǎo)致總氮小于或等于氨氮的可能性。
水樣色度和濁度的影響
由于水樣未經(jīng)處理或混凝沉淀不完全，氨氮結(jié)果偏大，總氮測(cè)定時(shí)水樣的色度和濁度，經(jīng)過(guò)40min高溫消解后，可以發(fā)現(xiàn)有比色管底部有白色沉淀，水樣無(wú)色透明，消除了對(duì)總氮結(jié)果的影響。因此，在氨氮的檢測(cè)中，如果混凝沉淀不能去除顏色并完成沉淀，則采用蒸餾法進(jìn)行沉淀，可以更好地消除大氨氮對(duì)結(jié)果的影響。
高含量酒石酸鉀、鈉、銨的影響
配制氨氮所需藥物時(shí)，要注意鉀、鈉、酒石酸銨含量高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致氨氮含量超標(biāo)，結(jié)果大于總氮。酒石酸鉀鈉僅加熱煮沸并不能完全除去氨，應(yīng)加入少量氫氧化鈉溶液煮沸，使溶液體積的25%左右蒸發(fā)。銨鹽使結(jié)果更準(zhǔn)確。
概括
1、總氮和氨氮項(xiàng)目應(yīng)在收到水樣的第一時(shí)間檢測(cè)，并要求兩人同時(shí)檢測(cè)，以免不同時(shí)間檢測(cè)的影響。
2、嚴(yán)格控制總氮測(cè)定所需試劑的質(zhì)量和整個(gè)制備過(guò)程，避免總氮消化不完全造成的影響。
3、氨氮檢測(cè)前處理好色度、濁度、氨氮值大等因素。